Hvordan bruke en invertert fluorescerende mikroskop

Hvordan bruke en invertert fluorescerende mikroskop


Et mikroskop er standard utstyr i et forskningslaboratorium, og brukes til å forstørre ting som er så små at de ikke lett kan sees med det blotte øye. I profesjonelle laboratorier, mikroskopiske krystaller, databrikker, celler, vev og selv hele mikroorganismer, kan undersøkes under et mikroskop. Den overflod av avanserte mikroskoper, for eksempel laser-scanning confocal mikroskoper, har gjort mikroskopi teknikk utfordrende. Invertert fluorescerende mikroskop er dyre og krever omfattende vedlikehold og drift av dyktighet. Av disse grunner, er det sjelden å finne en utenfor det profesjonelle vitenskapelige bransjen.

Bruksanvisning

1 Bli kjent med alle de vitenskapelige begreper som brukes i mikroskopi og fluorescens bildebehandling. Hvis du er ukjent med avansert mikroskopi, fluorescens og vitenskapelig terminologi, er det viktig at du søker tutorials eller formelle klasser i naturfag. I tillegg må du være kjent med komponentene i et mikroskop. Inverted fluorescens mikroskopi er helt uegnet for nybegynnere eller lekmann.

2 Slå på strømmen til det lyse feltet lyskilde, kamera og UV-lyskilde for påfølgende fluorescens signal deteksjon. Plasser en blokkering eller mørk filter for å sile ut UV-lys til den er klar til bruk for fluorescerende bildebehandling.

3 Plasser lysbildet som inneholder prøven på scenen og fest den med lysbildeholderen nålene. Sett kondensatoren til "Bright-Field" for farget eller histologiske prøver, slik at de er synlige under hvitt lys eller "Phase-Contrast" for ufargede prøver. Se etter prøven med okularet.

4 For å redusere den lyse-feltet lysintensitet, sette inn eller bytte til filter nøytral tetthet som leveres med mikroskopet. Juster disse til passende lysintensitet. Juster forstørrelsen av prøven viste ved å dreie sakte de fine og grove justeringsknapper til prøven oppløsningen er fin og klar. Det skal ikke være noen misfarging eller andre uregelmessigheter fra refracting lysstråler.

5 Slå på kameraet (i de fleste mikroskoper, er det ingen måte å gjøre dette annet enn å starte programvaren) til hva bildeopptak og analyse programvare er installert av produsenten på datamaskinen som er koblet til mikroskopet. Sett opp parametere for skala, forstørrelse, mål, etc. Sett programvare deretter til «Live Imaging" in "Bright-feltet."

6 Når prøven er klar, slå av lyskilden og slå på fluorescerende lys (UV) strømkilde. Igjen, gjør tilpasninger til UV kraft intensitet for å skru opp eller ned fluorescerende signal fra prøven.

7 Når prøven er klar til å bli fotografert, slå ned programvaren fra «Live Imaging" til "Image Acquisition." Still inn passende blenderåpningen, eksponeringstid, fokus og andre nødvendige parametre. Legg merke til at det bildet observeres via okularet ikke vil være den samme som den som ble kjøpt av kameraet og på dataprogramvare. Omfattende justering av parametre, slik som fokus og fluorescens-intensitet, vil alltid være nødvendig.

Hint

  • Alle mikroskoper varierer fra produsent til produsent, så kan du se produsentens eller fabrikkspesifikasjonene før start. Sjekk om målene (linser) brukes krever en nedsenking media (olje, glycerol, vann, eller hva er anbefalt av produsenten) og sørge for at disse er enten pre-filtrert for å fjerne støv og urenheter eller kjøpt fersk og sterilt. Bli kjent med hvorvidt lyset er påkrevet for kondensatoren som brukes og sette disse på riktig måte. Igjen, ulike mikroskoper har ulike krav til dette, så hvis du er usikker, ta kontakt med produsenten. Ikke juster Koehler-belysning med mindre profesjonelt trenet til å gjøre det, så disse feilene er svært vanskelig å korrigere.
  • Fluorescerende mikroskopi er absolutt ikke en teknikk som skal forsøkes av lekmann eller nybegynner, og definitivt ikke noen som ikke er utdannet vitenskapsmann. Utstyret er dyrt og inneholder lasere og strømkilder som kan forårsake betydelig skade. Hvis du ikke er en profesjonell vitenskapsmann, søke utdanning fra aktuelle personer og ikke gå videre før du er sikker på om utstyret tas i bruk.